От момента оплодотворения до переноса или криоконсервации эмбрион проводит в лаборатории эмбриологии около 120 часов (иногда больше, если мы культивируем эмбрион не до пятых, а до шестых суток). За это время эмбрион человека претерпевает существенные изменения, а за его развитием внимательно наблюдают клинические эмбриологи.
Стадия зиготы
Эмбрион человека после оплодотворения называется зиготой. Зигота в норме содержит два пронуклеуса — это мужское и женское ядро, которые через 16-18 часов после оплодотворения отчетливо видны в цитоплазме зиготы.
Стадия дробления
Дробление представляет собой процесс митотического деления клеток в пределах блестящей оболочки ооцита (то есть количество клеток эмбриона увеличивается, при этом их размер уменьшается).
Первое деление дробления — это деление эмбриона на две клетки, которые называются бластомерами. На вторые сутки после оплодотворения, как правило, мы видим эмбрионы, состоящие из четырех бластомеров, к третьим суткам эмбрион состоит из 8-12 бластомеров.
Очень важно, чтобы дробление было равномерным: каждый бластомер должен делиться ровно пополам. То есть из зиготы сначала формируется эмбрион, состоящий из двух бластомеров, далее один из этих двух бластомеров делится напополам и эмбрион становится трехклеточным, а когда и второй бластомер поделится, то четырехклеточным и т.д.
Дробление у человека асинхронное, поэтому при микроскопической оценке можно обнаружить любое число бластомеров: 2, 3, 4 и т.д. (при нормальном развитии стадии 3, 5 и т.д. бластомеров длятся значительно меньше, чем 2, 4, 8 – и потому наблюдаются реже).
В том случае, если бластомер поделится сразу на три клетки, говорят о так называемом direct cleavage, который считается признаком нарушений процесса дробления.
При дроблении мы можем наблюдать образование фрагментации. Фрагментация представляет собой небольшие части цитоплазмы бластомеров, заключенные в клеточную мембрану и не содержащие ДНК. Наличие незначительного количества фрагментов не имеет последствий для развития эмбрионов, однако, при фрагментации, составляющей более 25% от объёма эмбриона, уже можно предполагать, что вероятность формирования бластоцисты из такого эмбриона будет сниженной.
Для обозначения эмбрионов, находящихся на стадии дробления, принято использовать сочетание одной арабской цифры, которая обозначает количество бластомеров у эмбриона, и одной буквы латинского алфавита от A до D, которая характеризует равномерность дробления и/или наличие фрагментации.
Кроме того, в примечании могут быть указаны следующие характеристики дробящегося эмбриона:
- gr —грануляция цитоплазмы бластомеров;
- vac — присутствие вакуолей в цитоплазме клеток эмбриона;
- mnb – мультинуклеация (является плохим прогностическим признаком).
Стадия морулы
На четвертые сутки развития (92±2 часа после оплодотворения) эмбрион представляет собой компактную структуру, в которой границы клеток становятся неразличимы. Такая стадия развития называется морула.
Морула хорошего качества состоит из 16–32 бластомеров, и все бластомеры включены в процесс компактизации. Увеличение адгезии клеток друг к другу, как правило, начинается на стадии 8 бластомеров , а затем быстро прогрессирует со временем.
Морулы низкого качества характеризуются не полной компактизацией — когда часть бластомеров остается лежать отдельно; такие эмбрионы имеют сниженный потенциал к бластуляции.
Стадия бластоцисты
На пятые/шестые сутки культивирования эмбрион в норме формирует структуру, которая называется бластоцистой. Основными характеристиками бластоцисты являются ее размер и наличие двух структур в ее составе:
-
Размер бластоцисты оценивается цифрами от 1 до 6, где 1(единичка) — это стадия развития, следующая сразу за морулой, когда полость в бластоцисте только намечается. Постепенно полость эмбриона растет, заполняясь жидкостью, а вместе с полостью растет и сам эмбрион (от двойки до четверки). Блестящая оболочка (zona pellucida), в которую был заключен эмбрион на всех предыдущих этапах своего развития, истончается и разрывается, а эмбрион выходит из зоны (частично — пятёрка; полностью — шестёрка) и уже готов к имплантации в матку;
-
ВКМ — внутренняя клеточная масса — это шаровидное скопление клеток, которые отвечают за формирование плода после имплантации. Качество ВКМ описывают буквами от А до С, где А — это многоклеточная компактная ВКМ, а С, наоборот, ВКМ, состоящая из небольшого количества клеток, часто лежащих разрозненно;
-
Трофэктодерма — это клетки бластоцисты, образующие стенки ее полости и отвечающие за имплантацию эмбриона в матку.
Качество трофэктодермы также описывается буквами от А до С, где А — это многоклеточная трофэктодерма, а С — трофэктодерма, состоящая из малого количества клеток.
Согласно многочисленным исследованиям, стадия развития бластоцисты, на которой она была перенесена в полость матки, коррелирует с вероятностью имплантации: частота наступления беременности при переносе эмбрионов, находящихся на стадии 1-2, существенно ниже, чем эмбрионов от тройки и выше.
Количество клеток трофэктодермы и ВКМ также влияют на вероятность наступления беременности: чем их больше, тем частота наступления беременности выше.
.jpg)
