Криоконсервация эмбрионов — это способ сохранения эмбрионов в течение длительного времени при сверхнизких температурах.
В каких ситуациях может понадобиться криоконсервация эмбрионов?
- При получении в программе ВРТ большого количества эмбрионов на перенос идет только лучший эмбрион, а оставшиеся можно криоконсервировать и в дальнейшем использовать по необходимости;
- При возникновении риска синдрома гиперстимуляции яичников, когда перенос в «свежем» цикле отменяют и все выросшие эмбрионы замораживают;
- При проведении предимплантационного генетического тестирования, когда для определения генетического статуса эмбриона биоптат трофэктодермы отправляют на анализ в генетическую лабораторию и до получения результата и принятия решения о переносе, эмбрион замораживают;
- При получении донорских эмрионов.
Как осуществляется криоконсервация эмбрионов?
В настоящее время для криоконсервации эмбрионов применяют простой и максимально эффективный способ криоконсервации – витрификацию (дословно – это «остекловывание»).При витрификации эмбрион выдерживают в витрификационных растворах, которые содержат криопротекторы – вещества, замещающие воду в клетках эмбриона.
Почему нам так важно избавиться от воды в клетках?
Потому что именно молекулы воды при снижении температуры образуют кристаллы, которые оказывают повреждающее действие на мембранные структуры клеток. Замещая воду на криопротекторы, мы сохраняем клетки неповрежденными после их оттаивания.
Благодаря применению витрификации в практике эмбриологической лаборатории удалось значительно повысить выживаемость эмбрионов после крио, доведя этот показатель до 90-95%.
Как устроены носители, на которых замораживают эмбрионы?
Эмбрионы человека на 5 сутки развития (а именно на этой стадии мы морозим эмбрионы) хоть и состоят из более чем ста клеток, но по размерам не превышают 300-400 мкм.
Такие микроскопические структуры эмбриологи замораживают на крионосителях, которые можно разделить на две большие группы:
- Открытые носители. Это тоненькие пластиковые палочки, состоящие из двух частей:
1.1 — прозрачная пластиковая «лопаточка» (твердая) или «лепесток» (мягкий), куда эмбриолог кладет эмбрионы/ооциты вместе с небольшим количеством витрификационного раствора и— прикрепленная к лопаточке/лепестку непрозрачная ручка, за которую эмбриолог держит носитель и которая нужна для его маркировки (указывается фамилия, имя и отчество пациентки, дата рождения, дата криоконсервации, качество и количество ооцитов/эмбрионов);
1.2 чехол, которым носитель с эмбрионом закрывается уже в жидком азоте, и который выполняет две функции: защищает эмбрионы/ооциты и «утяжеляет» носитель за счет металлического кончика, не позволяя носителю всплывать в жидком азоте. Чехол закрывает носитель не герметично, поэтому такие системы и называются открытыми. - Закрытые носители: в КИРМ мы используем носители Rapid-i (Vitrolife, Швеция), которые являются максимально удобными для витрификации небольшого количества ооцитов/эмбрионов. Состоят такие носители из двух частей:
2.1 Внутренняя часть представляет собой прозрачную пластиковую палочку с уплощенным кончиком, в центре которого есть отверстие для размещения эмбрионов/ооцитов;
2.2 Внешняя часть — это прозрачный упругий пластиковый чехол, внутрь которого помещается палочка с эмбрионами, после чего этот чехол герметично запаивается. Внешняя часть закрытого носителя Rapid-i также имеет металлическую вставку для утяжеления носителя.
Одним из самых распространенных и широко используемых в России открытых носителей является носитель CryoTOP (Kitazato, Япония). В КИРМ на криотопах мы морозим ооциты.
Как долго могут хранится эмбрионы в жидком азоте?
В настоящее время есть данные о беременностях, наступивших после хранения эмбрионов в замороженном состоянии в течение 30 лет. Многие исследования подтверждают, что при соблюдении условий хранения, эмбрионы могут храниться 5-10 и более лет, и фактически, бесконечно.
